膜糖蛋白73(GP73) 抗原
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笃玛主要经营:ELISA试剂盒,标准品,抑制剂,染液,抗体等。

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产品名称:膜糖蛋白73(GP73) 抗原
产品货号: DM00188
形式:Purified(90%)
笃玛主要经营:ELISA试剂盒,标准品,抑制剂,染液,抗体等。
来源: Recombinant
应用: Calibrator, Immunogen
规格: 100ug
产品询价:您可以通过电话、邮件、传真或在线客户方式询价
主要用途:科研检测,不得用于临床诊断。


膜糖蛋白73(GP73) 抗原抗血清的纯化与保存

(1)采血:加强免疫的动物2—3次后,可通过耳静脉或眼球(小鼠)采血,进行抗血清效价测定。当效价达到理想的高度后,可以采血。采血方式可以从心脏直接取血,也可通过动脉放血。待血液凝固后用针筒或吸管吸取血清。
(2)抗血清的纯化与保存:除抗体外血清中含有多种其他蛋白成分。为了避免这些蛋白质干扰抗体(免疫球蛋白)标记反应和抗原抗体反应,抗血清可经过纯化以获得单一的机体(常为IgG)组分。常用的纯化IgG的方法为饱和硫酸胺盐析和层析法。蛋白质在不同的盐浓度的溶液中,其溶解度不一样,盐离子干扰蛋白质和水分子间氢键形成,因为水—盐结合比水—蛋白质结合更稳定,蛋白质即可从溶液中沉淀出来。蛋白质分子越大,沉淀时所需盐离子浓度越。免疫球蛋白(Mr 1.5×105)比血清中主要蛋白质白蛋白(M r 6.7×104)的分子大得多,抗体在30%—50%饱和度的硫酸盐中析出,而白蛋白需在70%—80%饱和度才析出,因此常用33%饱和度的硫酸胺纯化血清中的IgG。盐析时为了减少抗体变性,需在4℃进行,同时用pH8.0缓冲液稀释抗血清,以减少蛋白浓度过高而发生共沉淀。铵盐的溶解度不随温度变化而明显改变,0℃和25℃仅差3%,而钠盐则相差5倍,因此常在温沉淀时用铵盐,室温沉淀用钠盐。铵盐对抗体的标记反应(如FITC和biotin标记时)有的干扰作用。
盐析法只能部分纯化抗体,更高纯度的抗体制剂可用层析法制备。IgM五聚体相对分子质量达9.7×10,比血清中任何其他蛋白都大,用分子筛层析很容易将其纯化。IgG在PH 8.0时带负电荷,能与DEAE纤维素上的阳离子结合,因此可用离子交换层析来纯化IgG。IgG纯化常用的方法为亲和层析。IgG与葡萄球菌A蛋白和链球菌G蛋白具合高度的亲和性,可用这两种蛋白质交联亲和层析柱将IgG纯化。大部分IgG与蛋白A结合PH为8—9,洗脱PH为2—4;而与蛋白G的结合PH为5—7,洗脱PH为9—10。C蛋白更适合于IgG的纯化,不但反应条件为温和的弱酸性或弱碱性,并且与IgG的结合力高于A蛋白。G蛋自能与大部分动物种类的IgG结合,而A蛋白对小鼠IgG1、大鼠IgG2b、人IgG3、马和绵羊IgG结合力弱或不能结合G蛋白和A蛋白均不能与鸡IgG结合。
抗血清或纯化的抗体在温保存可维持活性数年,冻融使抗体很快失活,被细菌或霉菌污染的抗血清或IgG制品也易失去活性。稀释的抗血清加入防腐剂叠氮化钠和保护剂如BSA等可于4℃保存。保存常用等量甘油于—20℃以下冷藏。也可置于 50%饱和硫酸铵中4℃保存,还可以冷冻干燥保存。


供应产品

膜糖蛋白73(GP73) 抗原

胃蛋白酶原(PGA Antigen -pepsinogen I, PG I) DM00178
胃蛋白酶原(PGC Antigen -pepsinogen II, PG II) DM00179
CK8 Antigen DM00180
CK18 Antigen DM00181
CK20 Antigen DM00182
P53 Antigen DM00183
DKK1 Antigen DM00184
人胰蛋白酶原II (TrypsinogenII,TG2) DM00185
人附睾蛋白4 (human epididymis protein 4,HE4) DM00186
人附睾蛋白4 (human epididymis protein 4,HE4) DM00187
膜糖蛋白73(GP73) 抗原 DM00188
磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(glypican-3,GPC3)Antigen DM00189
热休克蛋白90a (HSP90a) DM00190
胃泌素前体释放肽片段(Pro-GRP)antigen DM00191
ProGRP31-98 antigen DM00192
P185 antigen  (HER2/neu) DM00193


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