一、 DNA甲基化简介
在甲基转移酶的催化下,DNA的CG两个核苷酸的胞嘧啶被选择性地添加甲基,形成5-甲基胞嘧啶,这常见于基因的5'-CG-3'序列。DNA甲基化导致某些区域DNA构象发生变化,从而影响了蛋白质与DNA的相互作用,且达到程度时将导致基因失活。
二、 甲基化检测流程
详见图片1说明。
三、 服务要求
1、提供的样品
提供细胞(≥106 个)、组织(≥300mg)、血液(≥1ml)、血清(≥1.5ml)等样品材料,基因组DNA(体积≥20μl,浓度≥50 ng/μl)。
2、提供详细的样本信息:
BSP方法待测序列≤300bp,焦磷酸测序待测序列≤60bp,且上下游保留200bp用于引物设计;MSP方法要求提供待测序列的CG侯选位点。
四、订购信息
(1)DNA提取:新鲜组织、血液、细胞,1周;
(2)引物设计:设计、合成,1-2周;
(3)MSP法:甲基化修饰、PCR扩增、电泳检测,1-2周;
(4)BSP克隆测序法:甲基化修饰、PCR扩增、克隆、测序,3-4周;
(5)焦磷酸测序:甲基化修饰、PCR扩增、测序,1-2周
五、报告内容
实验方法,步骤,所用试剂,仪器,引物序列、电泳图片、测序峰图、阳性克隆质粒;保留剩余引物和模板。
联系我时,请说是在找找去看到的,谢谢!