FCS条件性恐惧分析系统
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FCS条件性恐惧分析系统

实验原理:

BW-NFC402条件恐惧(FCS)用于小型啮齿类动物(大、小鼠)环境相关条件恐惧实验研究。啮齿类动物在恐惧时会表现出特有的不动状态(immobility),动物在这种情况下倾向于保持静止不动的防御姿势。抗抑郁药和抗中枢兴奋药可以明显缩短不动状态持续的时间,所以常常用于焦虑、抑郁领域研究,也可以用于恐惧消退等的研究。

实验过程中,实验对象被给与一个声音信号(条件刺激),随后给予电击(非条件)刺激。该训练称为条件训练,训练结束后实验动物进行声音信号或环境联系实验。一般情况下啮齿类动物对相应的环境和不同环境下同样的声音信号都会做出明显的条件恐惧反应,如静止不动。这种测试可以在训练结束后立刻或几天后进行可以提供在条件信号影响下短期和记忆的信息。

实验步骤:

实验分为三个阶段:

阶段:条件训练(1天)

无刺激     180s

声音信号   30s

电击       2s

无刺激     20s

阶段为训练实验,实验动物被给与条件声音刺激。

阶段:环境相关(2天)

无刺激     180s

阶段将实验动物放入阶段中的环境中以期评价环境相关的条件恐惧程度。

 

第三阶段:改变的环境相关信息(2天+2h)

无刺激    180s

声音      180s

无刺激    60s

改变环境信息(比如在实验箱中放入一个分隔板、改变光源和背景噪音或用其他溶液清洗实验箱等)后观察动物的条件恐惧程度。刺激的顺序由实验者决定。

实验结束后通过软件系统对记录的数据进行分析。

以上的实验中,阶段没有给与任何刺激但是实验动物表现出明显的环境相关恐惧。在第三阶段,同一只动物在改变了环境后没有表现出任何不动反应(活动减少),但是在给与声音信号后,可以观察到明显地条件恐惧反应。

 


实验硬件:

1 实验箱组件:

由铝合金、医用有机玻璃制成,方便拆卸更换,无毒无味,外观美观坚固耐用。实验环境由场景集控器控制,集控器集成了通风扇、蜂鸣器、LED白光灯和红外灯等,安装于实验箱顶盖上,用来提供实验所需的环境及条件刺激信号。

 

2 条件控制器:用于人工控制声音发生、光源、电刺激等

                                  

3 电击器:条件恐惧电击器(与金属栅栏相连),另一端与控制器相连。装有电击模块的微处理器提供持续的电流刺激,通过软件可调刺激电流。

 

 

记录的参数:

1) Freezing相关:实验时间、freezing总次数、每次freezing时间点、每次freezing持续时间、freezing总时间、freezing时间占总时间的百分比、

2) 活动度相关:总实验时间、总活动距离(cm)、总平均速度(cm/s)、每个阶段的时间、距离及平均速度

 

 结果计算与分析

因为不同类型的学凝滞时间不同,所以常使用百分计: 关联=(关联测试中的凝滞得分/30)* 变更关联(条件刺激前)=(变更关联中的凝滞得分/18)* 听觉暗示(条件刺激)=(听觉条件刺激中凝滞得分/18)* 对每一不同的凝滞测试计分进行重复测量单因素方差分析(ANOVA),从此比较关联和变更关联或听觉暗示之间的条件恐惧程度,并确定组间差异。一般而言,动物在听觉暗示中的凝滞行为要比关联测试的多。在变更关联测试中,由于关联条件箱已被改造得“面目全非”,训练时动物获得的对周围环境的关联几乎不存在,因此,凝滞行为应该少。关联与变更关联差别很大,凝滞计分差别越大。 如果动物在天的关联测试和听觉暗示测试中出现凝滞,而在变更关联测试中不表现凝滞行为,则可认定:动物的感觉和运动功能均正常;能记住前与厌恶刺激配对出现的暗示信号;能分辨前不与厌恶刺激配对出现的暗示信号,说明动物具有正常的记忆。这些测试中的任何一项增强或减弱,提示调节记忆情感部分的神经解剖、神经递质和基因可能发生变化。
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